第五节 人工制备抗体

　　(一)多克隆抗体(pAb)是用Ag(含有多种epitopes)免疫动物后，从其血清中提取的Ab。为多种Ab的混合物，故名。

　　获得pAb的主要途径有：动物免疫血清，恢复期病人，免疫接种人群

　　pAb的优势是：⑴作用全面(中和、调理、补体介导的细胞毒作用等，在体外容易容易出现凝集和沉淀反应。)

　　⑵来源广泛，容易制备

　　pAb的缺点是：⑴特异性不高，易发生交叉反应

　　⑵不易大量制备

　　(二)单克隆抗体(mAb)是由一个B细胞杂交瘤克隆合成和分泌的抗单一抗原表位的特异性Ab。

　　1975年Kohler和Milstein采用细胞融合技术使可产生特异性抗体的免疫小鼠脾脏B细胞与长寿的小鼠恶性骨髓瘤细胞融合，筛选出可产生Ab的杂交瘤细胞并克隆化制成。

　　mAb的Ag结合部位和同种型都相同。因此具有下优点：①结构均一、纯度高;②特异性强;③交叉反应少;④效价高(即Ab浓度高);

　　⑤制备成本低，可大量生产。在疾病的预防、诊断和治疗上有广泛的用途。

　　缺点是：①对人具有较强的免疫原性;②体外抗原抗体结合试验不易出现可见反应。

　　(三)基因工程抗体：是即可保持mAb的均一性、特异性强的优点，又能克服鼠源性的弊端的新型Ab。

　　基本思路是将部分或全部人源抗体的编码基因，克隆到真核或原核表达系统中，体外表达嵌合抗体或人源化Ab;或培育出剔除自身抗体编码基因，又敲入人Ig基因的小鼠等动物，通过抗原免疫，再用该动物的脾B细胞与人骨髓瘤细胞融合，即可产生完全人mAb。

　　1.人-鼠嵌合Ab V区是鼠源的，C区是人源的 Ab。

　　2.人源化Ab

　　3.双特异性Ab

　　4.小分子Ab

　　目前，基因工程抗体已成功应用于临床上，治疗肿瘤及自身免疫性疾病。

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