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　　固相膜免疫测定

　　一、A1

　　1、以下属于固相膜的技术相关的是

　　A、孔径

　　B、流速

　　C、蛋白质结合力

　　D、均一性

　　E、以上都是

　　2、下列关于免疫渗滤试验叙述错误的是

　　A、免疫渗滤试验(IFA)用于检测各种传染病的抗体和肿瘤标志物等

　　B、斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)是将抗原或抗体点加在固相载体硝酸纤维素薄膜上

　　C、斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)抗原抗体反应后，形成大分子胶体金复合物，从而使阳性结果在膜上呈现红色斑点

　　D、斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)简化了操作步骤，成为床边检验(POCT)的主要方法之一

　　E、斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)除试验盒本身外，还需要一些仪器设备辅助

　　3、固相膜免疫测定中最为常用的固相膜是

　　A、玻璃纤维素(fiberglass)膜

　　B、尼龙(nylon)膜

　　C、聚偏氟乙烯(PVDF)膜

　　D、硝酸纤维素(NC)膜

　　E、以上都不是

　　4、当前免疫电镜技术中应用最广的标记物是

　　A、辣根过氧化物酶

　　B、硝酸银

　　C、胶体金

　　D、铁蛋白

　　E、SPA

　　5、下列关于免疫印迹中需要注意的问题错误的是

　　A、影响免疫印迹成败的一个主要因素是抗原分子中可被抗体识别的表位的性质

　　B、免疫印迹实验中常选用单克隆抗体

　　C、有若干种方法常用于提高免疫印迹的灵敏度，一种是在电泳之前应用免疫沉淀法将抗原进行纯化和浓缩

　　D、IBT法在临床应用中存在一定的局限性

　　E、本法综合了SDS-PAGE的高分辨力和ELISA法的高特异性和敏感性，是一个有效的分析手段

　　6、关于免疫印迹法下列错误的是

　　A、免疫印迹法(IBT)亦称酶联免疫电转移印迹法

　　B、IBT是在蛋白质电泳分离和抗原抗体检测的基础上发展起来的一项检测蛋白质的技术

　　C、它将SDS-聚丙烯酞胺凝胶电泳的高分辨力与抗原抗体反应的高特异性相结合

　　D、第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

　　E、第三阶段为电转移。此阶段分离的蛋白质条带肉眼可见

　　7、免疫金制备时通常用到的高分子稳定剂有

　　A、葡聚糖

　　B、PEG2000

　　C、明胶

　　D、BSA

　　E、以上都是

　　8、下列有关斑点金免疫渗滤试验双抗体夹心法的叙述中，错误的是

　　A、以硝酸纤维素膜为载体

　　B、用胶体金标记抗原

　　C、首先滴加纯化的抗体试剂(首先用纯化的抗体固定在硝酸纤维素膜上)

　　D、膜中央出现红色斑点即为阳性反应

　　E、斑点颜色的深浅可提示阳性的强弱

　　9、制备胶体金常用的还原剂有

　　A、枸橼酸钠

　　B、鞣酸

　　C、维生素C

　　D、白磷

　　E、以上都是

　　10、下列有关胶体金特性的叙述中，错误的是

　　A、胶体金颗粒稳定、均匀地分散悬浮在液体中

　　B、电解质可使胶体金沉淀

　　C、较大颗粒的胶体金是橙黄色的

　　D、蛋白质有保护胶体金稳定性的作用

　　E、胶体金颗粒越小，其吸收波长越短

　　参考答案：

　　一、A1

　　1、

　　【正确答案】 E

　　【答案解析】 以上选项均是固相膜的技术要求方面。

　　2、

　　【正确答案】 E

　　【答案解析】 斑点金免疫渗滤试验(DIGFA)除试验盒本身外，不需要任何仪器设备。

　　3、

　　【正确答案】 D

　　【答案解析】 固相膜免疫测定中常用的膜为玻璃纤维素(fiberglass)膜、尼龙(nylon)膜、聚偏氟乙烯(PVDF)膜和硝酸纤维素(NC)膜等。其中最常用为NC膜。

　　4、

　　【正确答案】 C

　　【答案解析】 胶体金标记免疫电镜技术是利用胶体金在碱性环境中带有负电的性质，使其与抗体相吸附，从而将抗体标记。

　　5、

　　【正确答案】 B

　　【答案解析】 影响免疫印迹成败的一个主要因素是抗原分子中可被抗体识别的表位的性质。只有那些能识别耐变性表位的抗体可与抗原结合，多数多克隆抗血清中或多或少地含有这种类型的抗体，所以在免疫印迹实验中常选用多克隆抗体。

　　6、

　　【正确答案】 E

　　【答案解析】 免疫印迹法第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)。第二阶段为电转移。此阶段分离的蛋白质条带肉眼仍不可见。第三阶段为酶免疫定位。将印有蛋白质条带的硝酸纤维素膜(相当于包被了抗原的固相载体)依次与特异性抗体和酶标第二抗体作用后，加入能形成不溶性显色物的酶反应底物，使区带染色。

　　7、

　　【正确答案】 E

　　【答案解析】 免疫金制备多种蛋白质、葡聚糖、PEG2000、明胶等均为良好的高分子稳定剂，PEG和BSA是最常用的稳定剂。

　　8、

　　【正确答案】 B

　　【答案解析】 斑点金免疫渗滤试验双抗体夹心法中，用胶体金标记的是抗体。

　　9、

　　【正确答案】 E

　　【答案解析】 除以上选项外，硼氢化钠也是常用还原剂。

　　10、

　　【正确答案】 C

　　【答案解析】 最小的胶体金颗粒(2～5nm)是橙黄色的，中等大小的颗粒(10～20nm)是橙色的，较大颗粒(30～80nm)则是紫红色的。

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