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　　生物素-亲和素放大技术

　　一、A1

　　1、每个亲和素能结合生物素分子的数目是

　　A、4

　　B、2

　　C、1

　　D、3

　　E、8

　　2、生物素亲和素系统(BAS)放大作用的机制主要是

　　A、亲和素的四个生物素部位可同时结合多价性的生物素化衍生物

　　B、生物素、亲和素可分别与酶、放射性核素等结合形成标记物

　　C、二者之间极高的亲和力

　　D、经化学修饰后，生物素成为活化生物素

　　E、生物素、亲和素之间为特异性结合

　　3、活化生物素标记大分子蛋白质后，影响生物素活性的主要因素是

　　A、大分子蛋白质中的赖氨酸的a氨基

　　B、连接臂的6-氨基己糖基团

　　C、大分子蛋白的空间位阻效应

　　D、大分子蛋白的等电点发生改变

　　E、以上都不是

　　4、ABC-ELISA将酶标记在

　　A、亲和素

　　B、生物素

　　C、抗体

　　D、补体

　　E、抗原

　　5、关于生物素标记蛋白质的注意事项，下列说法错误的是

　　A、根据抗原或抗体分子结构中所带可标记基团的种类以及分子的理化性质，选择相应的活化生物素和反应条件

　　B、活化生物素与待标记抗原或抗体可以是任意比例

　　C、在生物素与被标记物之间加入交联臂样结构可减少空间位阻影响

　　D、生物素与抗原、抗体等蛋白质结合后不影响后者的免疫活性

　　E、生物素标记酶时会影响其免疫活性

　　6、亲和素和生物素结合的特点是

　　A、免疫反应

　　B、不属于免疫反应

　　C、特异性弱

　　D、亲和力小

　　E、不够稳定

　　参考答案：

　　一、A1

　　1、

　　【正确答案】 A

　　【答案解析】 亲和素(AV)亦称抗生物素蛋白、卵白素，是从卵白蛋白中提取的一种由4个相同亚基组成的碱性糖蛋白。每个亲和素能结合4个分子的生物素，二者之间的亲和力极强。

　　2、

　　【正确答案】 A

　　【答案解析】 每个亲和素分子有四个生物素结合部位，可同时以多价形式结合生物素化的大分子衍生物和标记物。因此，BAS具有多级放大作用，使其在应用时可极大地提高检测方法的灵敏度。

　　3、

　　【正确答案】 C

　　【答案解析】 活化生物素标记大分子蛋白质后，影响生物素活性的主要因素是大分子蛋白的空间位阻效应。空间位阻效应主要是指分子中某些原子或基团彼此接近而引起的空间阻碍和偏离正常键角而引起的分子内的张力。

　　4、

　　【正确答案】 B

　　【答案解析】 酶标记生物素分子，与亲和素按一定比例混合，形成亲和素-酶标生物素复合物。

　　5、

　　【正确答案】 B

　　【答案解析】 生物素标记蛋白质的注意事项包括：①根据抗原或抗体分子结构中所带可标记基团的种类以及分子的理化性质，选择相应的活化生物素和反应条件。②标记反应时，活化生物素与待标记抗原或抗体应有适当比例。③为了减少空间位阻影响可在生物素与被标记物之间加入交联臂样结构。④生物素与抗原、抗体等蛋白质结合后不影响后者的免疫活性;标记酶时则结果有不同。

　　6、

　　【正确答案】 B

　　【答案解析】 亲和素与生物素结合不属于免疫反应，但特异性强，亲和力大，两者结合后极其稳定。

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