2014主管药师辅导：高效液相色谱法的应用

　　高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography \ HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。

　　高效液相色谱法

　　(一)速率理论

　　高效液相色谱法中影响柱效主要因素为涡流扩散项和传质阻抗项。由于液体黏度比载气大得多，而且柱温多为室温，其纵向扩散项很小，可忽略不计。范氏方程简化为 H=A +Cμ 。

　　(二)高效液相色谱仪

　　1.高压输液泵

　　2.色谱柱：分析型和制备型

　　3.进样阀

　　3.检测器：①固定波长检测器;②可变波长检测器;③光二极管阵列检测器

　　(三)应用

　　高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量大(大于400以上)的有机物(这些物质几乎占有机物总数的75%～80%)原则上都可应用高效液相色谱法来进行分离、分析。据统计，在已知化合物中，能用气相色谱分析的约占20%，而能用液相色谱分析的约占70～80%。

　　编辑推荐：

　　2014年全国卫生资格考试报考指南

　　2014年全国卫生资格考试报名时间预测

　　2013年卫生资格考试成绩查询免费提醒