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2017年公卫执业医师综合笔试精选复习笔记(20)

来源:考试吧 2016-10-31 11:23:45 要考试,上考试吧! 公卫执业医师题库
考试吧整理了“2017年公卫执业医师综合笔试精选复习笔记”,以供考生备考,更多内容请关注“考试吧执业医师”微信,或考试吧执业医师考试网。

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  限制性片段长度多态性检测技术

  这是首先建立的对多态性进行检测的DNA分析技术。个体间抗原特异性来自氨基酸顺序的差别,后者由编码基因的碱基顺序不同所决定。这种碱基顺序的差别造成限制性内切酶识位置及酶切位点数目的不同,从而产生数量和长度不一的DNA酶切片段。用特异性探针对整个基因组DNA酶切片段进行杂交,即可分析限制性长度片段多态性。一定的内切酶组合所得到的HLA-RFLP可以和传统方法测定的HLA特异性型别相关。80年代末发展起来的PCR技术已被用于RFLP分析,即用等位特异限制酶裂解PCR扩增的片段,然后再进行分析,从而大提高了灵敏度。

  HLA-Ⅰ类抗原的检测

  HLA-A、B、C抗原型别鉴定均借助微量淋巴细胞毒试验或称补体依赖的细胞毒试验。原理为取已知HLA抗血清加入待测外周血淋巴细胞,作用后加入免补体,充分作用后加入染料,在倒置显微镜下判断结果,着染的细胞为死亡细胞,表示待检淋巴细胞表面具有已知抗血清所针对的抗原。标准抗原清取自多次经产妇或计划免疫志愿者。

  细胞学分型技术

  HLA-Dw特异性与HLA-DP特异性可分别通过纯合分型细胞及预致敏淋巴细胞试验检测。二种方法的基本原理均是判断淋巴细胞在识别非已HLA抗原决定簇后发生的增殖反应。由于分型细胞来源困难以及操作手续繁琐,细胞学分型技术下正逐渐淘汰。

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