常用染料（熟练掌握）

根据助色基解离后的带电情况，可将染料分为碱性和酸性两大类。此外，还有复合染料。

1、碱性燃料

电离后显色离子带正电荷，易与带负电荷的被染物结合。由于细菌的等电点在pH2-5之间，在碱性、中性、弱酸性的环境中细菌均带负电荷，易与带正电荷的染料结合而着色。常用的染料有碱性复红、结晶紫、亚甲兰等。

2、酸性染料

电离后显色离子带负电荷，易与带正电荷的被染物结合。一般情况下细菌都带有负电荷，不易着色。如果降低菌液的pH使细菌带正电荷，则可被染色。酸性染料通常用来染细胞质，而很少用于细菌的染色。常用的酸性染料有伊红、刚果红等。

3、复合染料（中性染料）及荧光染料

复合染料是碱性染料和酸性染料的复合物，如瑞氏染料、吉姆萨染料等；

荧光染料如荧光标记的抗体，荧光素常用异硫氢基荧光素。常用于某些特殊的染色技术中。

常用的染色方法（熟练掌握）

在细菌感染标本中，临床上常用的染色方法有革兰染色、抗酸染色和荧光染色。

1、单染色法

用一种染料将细菌和周围物体染成同一种颜色，称为单染色法。如吕氏亚甲蓝、结晶紫和稀释复红染色法。细菌经单染法处理后，可观察其大小、形态、排列及简单的结构，但不能显示各种细菌染色性的差异。

2、复染色法

用两种或两种以上不同染料可将细菌染成不同的颜色，称为复染法或鉴别染色法。该方法除可观察细菌的大小、形态与排列外，还反应出细菌染色特性，具有鉴别细菌种类的价值。常用的有革兰染色法和抗酸染色法。

（1）革兰染色：是细菌学中最经典、最常用的染色方法。除粪便、血液等极少数标本外，在培养前都要进行革兰染色、镜检。通过革兰染色将所有细菌分为G+菌和G-菌两大类，可初步识别细菌，缩小范围，有助于进一步鉴定。革兰染色除用于鉴定细菌外，病原菌革兰染色特性可为临床选择药物提供参考，帮助临床制定有针对性的治疗方案，因为G+菌与G-菌对一些抗生素表现出不同的敏感性，且其致病物质及其作用机制不同。

（2）抗酸染色：抗酸染色也可将细菌分为两大类：即抗酸性细菌和非抗酸性细菌。因临床上绝大多数病原菌为非抗酸性细菌，所以抗酸染色不作为临床常规的细菌检查项目，只针对性用于结核病、麻风病等的细菌检查。

（3）荧光染色法

荧光染色法敏感性强，效率高而且容易观察结果，在临床细菌鉴定中有很大的实用价值。主要用于结核分支杆菌、麻风分支杆菌、白喉棒状杆菌及痢疾志贺菌等的检测。经荧光素染色的细菌，或荧光素标记的荧光抗体与相应抗原的细菌、病毒结合形成的复合物，在荧光显微镜下发出荧光。

除以上染色方法外，用于细菌鉴定的还有鞭毛染色、异染颗粒染色等特殊染色。鞭毛染色后于显微镜下可以观察到菌体上有无鞭毛、鞭毛的位置及数量，在细菌鉴定中，特别是非发酵菌的鉴定中很重要。疑为白喉棒状杆菌感染，进行涂片检查，除证实为革兰阳性典型棒状杆菌外，还需用异染颗粒染色，镜检异染颗粒，才能为临床早期诊断提供依据。